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原文传递一种RNA检测方法

专利名称：	一种RNA检测方法
摘要：	本发明属于分子生物技术领域，具体的说是一种RNA检测方法，包括用于移动RNA的移液枪；该方法中通过将移液枪的吸嘴与吸头通过锁紧杆连接，不仅有效的降低了吸头与吸嘴装卸时的不便与磨损，也能有效的降低手部与吸头直接接触导致RNA的交叉污染，从而有效的提高了RNA在检测时的便捷性与准确性；且该方法中通过在锁紧杆顶端与二号槽口内部分别设有一号磁铁与二号磁铁，使得密封囊在两磁铁的压力下更紧密的贴合在吸嘴与吸头之间，从而对两者之间的空间进行更有效的密封，从而大大提高了RNA检测时的准确性。
专利类型：	发明专利
申请人：	李连娟
发明人：	苏生鹏;李智;郑豪
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN202010238888.8
公开号：	CN111208078A
代理机构：	广州高炬知识产权代理有限公司
代理人：	李顺
分类号：	G01N21/31;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/31
申请人地址：	525244 广东省茂名市高州市谢鸡镇木砖村3号
主权项：	1.一种RNA检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤： S1：研钵加液氮3次，加入样品，研磨至粉末，加入Trizol，且使每100mg组织加1ml的Trizol，充分研磨后放在室温下解冻，解冻过程中利用暖风机加速接解冻； S2：在S1中样品解冻后，将样品放在2-50℃环境下离心10min，使得不溶性物质沉淀，将RNA上清液通过移液枪的吸嘴(3)将RNA上清液吸入之后，再次沿同一方向甩动10-15次，再次用移液枪移入至1.5ml离心管中；在15-30℃下放置5min，使核蛋白复合物完全解离，加入0.2m1氯仿，振荡15sec，室温温浴2-3min，2-8℃离心15min，使得RNA全部溶解于上层水相中，用移液枪把水相移入另一1.5m1离心管中； S3：在S2中对核蛋白复合物完全解离后，向水相中加0.5m1氯仿，振荡15sec，室温下温浴2-3min；2-8℃下离心15min，把水相用移液枪转入至1.5m1离心管中，并加入0.5ml异丙醇，15-30℃温浴10min；2-8℃下离心10min，使得RNA沉积在离心管的底部及侧壁； S4：在S3中RNA沉积在离心管的底部及侧壁后，加入1ml75％乙醇，2-8℃温度离心5min，将上清液倒掉，将离心管倒扣在吸水纸上5-10min，每管加30u1的DEPC水，用DEPC水稀释100倍，并用紫外分光光度计测定0D值； S5：待移液枪使用完毕之后采用清水冲洗之后，利用75％的酒精进行杀毒，随后采用风机进行干燥，干燥完毕后，将手指放置在吸头(4)两端的锁紧杆(6)底端，通过对锁紧杆(6)底端施加压力使得锁紧杆(6)顶端从二号槽口(31)内转出，随后将移液枪的吸嘴(3)底端插入至吸头(4)内部，锁紧杆(6)顶端在转入二号槽口(31)的过程中也对其内部的密封囊(32)进行挤压，使得膨胀的密封囊(32)紧密贴合在吸嘴(3)与吸头(4)之间的间隙里，对吸嘴(3)与吸头(4)内部的空间进行密封；随后将移液枪倒置放入专用的冷藏箱内保存；其中，S2中使用的所述移液枪包括操作杆(1)、套筒(2)、吸嘴(3)与吸头(4)，所述操作杆(1)位于套筒(2)顶端，所述吸嘴(3)位于套筒(2)底部，所述吸头(4)安装在吸嘴(3)底端；所述吸头(4)顶端的侧壁上设置有一号槽口(41)，所述一号槽口(41)内设有弹性的密封膜(42)；所述吸头(4)外表面对称设有固定块(5)，所述固定块(5)上均用扭簧连接有弧形的锁紧杆(6)，所述锁紧杆(6)顶端与一号槽口(41)位置齐平，所述吸嘴(3)底端的外表面上设置有环形的二号槽口(31)，所述二号槽口(31)内设有一圈密封囊(32)，所述密封囊(32)受力挤压能够发生弹性变形；所述锁紧杆(6)顶端能够转动至二号槽口(31)内部并与之配合锁紧。 2.根据权利要求1所述的一种RNA检测方法，其特征在于：所述锁紧杆(6)顶端设有一号磁铁(61)，所述一号磁铁(61)能够转动至二号槽口(31)内部并与之配合锁紧，所述二号槽口(31)内端的侧壁上设有二号磁铁(33)，所述二号磁铁(33)与一号磁铁(61)磁性相反。 3.根据权利要求2所述的一种RNA检测方法，其特征在于：所述锁紧杆(6)底端一侧的吸头(4)侧面上对称设有限位块(7)，所述限位块(7)侧面至吸头(4)侧面的距离保持在1-2cm。 4.根据权利要求2所述的一种RNA检测方法，其特征在于：所述一号磁铁(61)的形状设置成由内向外半径逐渐增大的圆台状，所述二号槽口(31)的开口形状由内向外逐渐增大，所述一号磁铁(61)能够转动至二号槽口(31)内部并与之配合锁紧。 5.根据权利要求1所述的一种RNA检测方法，其特征在于：所述吸头(4)顶端的内壁上设有自上至下厚度逐渐增大的限位斜板(43)，所述吸嘴(3)底端的外壁上设置有自上至下深度逐渐增大的限位斜槽(34)，所述限位斜板(43)能够插入至限位斜槽(34)内部并与之配合；所述限位斜板(43)设置在一号槽口(41)底端的吸头(4)内壁上，所述限位斜槽(34)的底端与吸嘴(3)底面相通。
所属类别：	发明专利