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原文传递一种溪黄草特征图谱构建方法

专利名称：	一种溪黄草特征图谱构建方法
摘要：	本发明公开了一种溪黄草特征图谱构建方法，属于药材有效成分检测技术领域。在本发明中，制备标准品溶液和待测品溶液，在相适应的色谱条件下，分别进行高效液相色谱仪测定；其中，迷迭香酸标准品、咖啡酸标准品分别对待测品中迷迭香酸、咖啡酸色谱峰进行定位，且待测样品中迷迭香酸、咖啡酸色谱峰与相邻色谱峰分离良好，进而提高特征图谱测定方法具有较高的灵敏度和专属性。
专利类型：	发明专利
申请人：	成都普思生物科技股份有限公司
发明人：	蔚静;钟钰;李远志;张巨琼;胡亚兰;朱永红;吴柯霞;刘丁
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T23:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T10:00:00+0805
申请号：	CN201911334809.7
公开号：	CN110988187A
代理机构：	成都天嘉专利事务所(普通合伙)
代理人：	赵丽
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
申请人地址：	610045 四川省成都市武侯区武科西二路8号
主权项：	1.一种溪黄草特征图谱构建方法，其特征在于，基于反相高效液相色谱法，取迷迭香酸和咖啡酸为标准品，其中，色谱条件包括：以乙腈为流动A，以浓度为0.4%的磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱程序为： 0～50min，流动相A为5→20%，流动相B为95→80%； 50～90min，流动相A为20→35%，流动相B为80→65%； 90～95min，流动相A为35→80%，流动相B为65→20%； 95～100min，流动相A为80%，流动相B为20%； 100～101min，流动相A为80→5%，流动相B为20→95%。 2.根据权利要求1所述的溪黄草特征图谱构建方法，其特征在于，在反相高效液相色谱法中，色谱条件包括：色谱柱温为25℃，流动相流速为1 .0mL/min，检测波长为330nm，色谱柱为4.6 mm × 250 mm × 5μm，进样量为10μL。 3.根据权利要求2所述的溪黄草特征图谱构建方法，其特征在于，在反相高效液相色谱法中，检测器为紫外检测器或二极管阵列检测器。 4.根据权利要求1所述的溪黄草特征图谱构建方法，其特征在于，所述特征图谱构建方法包括标准品溶液的制备，具体为：迷迭香酸标准品溶液的制备，精密称定迷迭香酸标准品，加体积浓度为50%的乙醇，配制成每1mL含迷迭香酸0.3～0.8mg的标准品溶液；咖啡酸为标准品溶液的制备，精密称定咖啡酸标准品，加纯甲醇，配制成每1mL含咖啡酸10～60µg的标准品溶液。 5.根据权利要求1所述的溪黄草特征图谱构建方法，其特征在于，所述特征图谱构建方法包括待测品溶液的制备，具体为：精密称定待测品，置于具塞锥形瓶中，加入体积浓度为50%甲醇溶液，密塞，称定重量；超声处理30min；最后用50%甲醇补足减失重量，滤过，取续滤液，即得待测品溶液。 6.根据权利要求5所述的溪黄草特征图谱构建方法，其特征在于，在超声处理过程中，超声功率900W，超声频率为60kHz。 7.根据权利要求1所述的溪黄草特征图谱构建方法，其特征在于，在所述特征图谱构建方法中，以迷迭香酸标准品对待测品中迷迭香酸色谱峰进行定位，以咖啡酸标准品分别对待测品中咖啡酸色谱峰进行定位。 8.一种溪黄草汤剂、浸膏粉及配方颗粒的特征图谱构建方法，其特征在于，基于反相高效液相色谱法，取迷迭香酸和咖啡酸为标准品，具体包括如下步骤： S1.迷迭香酸标准品溶液的制备：精密称定迷迭香酸标准品，加体积浓度为50%的乙醇，配制成每1mL含迷迭香酸0.3～0.8mg的标准品溶液；咖啡酸为标准品溶液的制备：精密称定咖啡酸标准品，加纯甲醇，配制成每1mL含咖啡酸10～60µg的标准品溶液； S2.待测品溶液的制备：精密称定0.2～0.8g待测品，置于具塞锥形瓶中，加入25mL的体积浓度为50%甲醇溶液，密塞，称定重量；在功率900W及频率60kHz的条件下超声处理30min；最后用体积浓度的50%甲醇补足减失重量，滤过，取续滤液，即得待测品溶液； S3.色谱条件的建立：色谱柱为4.6 mm × 250 mm × 5μm，固定相为C18，色谱柱温为25℃，流动相流速为1.0ml/min，检测波长为330nm，检测器为紫外检测器或二极管阵列检测器；以乙腈为流动相A，以浓度为0.4%的磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱程序为：0～50min，流动相A为5→20%，流动相B为95→80%；50～90min，流动相A为20→35%，流动相B为80→65%；90～95min，流动相A为35→80%，流动相B为65→20%；95～100min，流动相A为80%，流动相B为20%；100～101min，流动相A为80→5%，流动相B为20→95%； S4.特征图谱建立：分别取10μL标准品溶液和待测品溶液，注入高效液相色谱仪中，测定，即得特征图谱。 9.一种溪黄草饮片的特征图谱构建方法，其特征在于，基于反相高效液相色谱法，取迷迭香酸和咖啡酸为标准品，具体包括如下步骤： Y1.迷迭香酸标准品溶液的制备：精密称定迷迭香酸标准品，加体积浓度为50%的乙醇，配制成每1mL含迷迭香酸0.3～0.8mg的标准品溶液；咖啡酸为标准品溶液的制备：精密称定咖啡酸标准品，加纯甲醇，配制成每1mL含咖啡酸10～60µg的标准品溶液； Y2.待测品溶液的制备：精密称定0.6～1.4g待测品，置于具塞锥形瓶中，加入30 mL纯化水，在90～110℃条件下加热回流30min，放至室温，过滤，用10 mL纯化水分2～3次清洗滤渣，收集滤液，蒸干，加体积浓度为50%甲醇溶解残渣，并转移至10 mL量瓶中定容，摇匀，滤过，取续滤液，即得待测品溶液； Y3.色谱条件的建立：色谱柱为4.6 mm × 250 mm × 5μm，固定相为C18，色谱柱温为25℃，流动相流速为1.0ml/min，检测波长为330nm，检测器为紫外检测器或二极管阵列检测器；以乙腈为流动相A，以浓度为0.4%的磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱程序为：0～50min，流动相A为5→20%，流动相B为95→80%；50～90min，流动相A为20→35%，流动相B为80→65%；90～95min，流动相A为35→80%，流动相B为65→20%；95～100min，流动相A为80%，流动相B为20%；100～101min，流动相A为80→5%，流动相B为20→95%； Y4.特征图谱建立：分别取10μL标准品溶液和待测品溶液，注入高效液相色谱仪中，测定，即得特征图谱。
所属类别：	发明专利